"BT-549 cell line人乳腺導管癌細胞系
細胞背景資料:該細胞1978年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系,源自一位72歲患有乳腺導管癌的白人女性,來源組織包括乳頭及浸潤導管。該細胞形態(tài)包括上皮樣細胞及多核巨細胞,可分泌一種粘性物質(zhì)。
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BT-549 cell line人乳腺導管癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預熱;③超凈臺臺面應整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉,以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
BT-549 cell line人乳腺導管癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
SCL-2細胞系相關產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
KU1919細胞系相關產(chǎn)品:MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
HR1K細胞系相關產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
OE19細胞系相關產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
SW 780細胞系相關產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
Kit225-K6細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
OAW 42細胞系相關產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
hRPTC細胞系相關產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
NCIH441細胞系相關產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
CAL12T細胞系相關產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
SJSA細胞系相關產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
ECC-12細胞系相關產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
BT-549 cell line人乳腺導管癌細胞系
DLD 1細胞系相關產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
MDAMB361細胞系相關產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
D283MED細胞系相關產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
D283MED細胞系相關產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
HOS/MNNG細胞系相關產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
GM05887A細胞系相關產(chǎn)品:MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞
Caco-2 BBe細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
BC-024細胞系相關產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
GC-2細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
NCI-SNU-761細胞系相關產(chǎn)品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
OCI-LY-8細胞系相關產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
343 MG細胞系相關產(chǎn)品:SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
HRPEpiC細胞系相關產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
SCH細胞系相關產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
P3 88 D1細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
H-28細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
293 c18細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
M-14細胞系相關產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞
THP1細胞系相關產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品:GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
EC109細胞系相關產(chǎn)品:Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
hTERTHME1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
JTC-39細胞系相關產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
COS1細胞系相關產(chǎn)品:Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
H-35細胞系相關產(chǎn)品:KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞
HCC-95細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
SK-CO-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
NCI/ADRRES細胞系相關產(chǎn)品:118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關產(chǎn)品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
NCIH69細胞系相關產(chǎn)品:RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
RK13細胞系相關產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
EFO-27細胞系相關產(chǎn)品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
IHH細胞系相關產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
T-ALL 1細胞系相關產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
SCL-I細胞系相關產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
RGM1細胞系相關產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
Hs 821.T細胞系相關產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
L78細胞系相關產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
BT-549 cell line人乳腺導管癌細胞系
U251n細胞系相關產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
KCL-22細胞系相關產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
MLE12細胞系相關產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
Hs 766細胞系相關產(chǎn)品:SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
PK-13細胞系相關產(chǎn)品:PG-BE1細胞、CCRF-SB細胞、Psi-2 DAP細胞
P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品:H-2291細胞、KYSE 180細胞、FRH-0201細胞
KU19-19細胞系相關產(chǎn)品:LTEPa2細胞、CHP-126細胞、SW 1116細胞
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