"MX-1 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MX-1 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MX-1 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
COLO320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細胞、U-251MG細胞、RBL.2H3細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、IMCD3細胞、HEI-193細胞
V 79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
HFLS-RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
MX-1 Thawing人乳腺癌細胞系
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
Pa17C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
U-343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
MX-1 Thawing人乳腺癌細胞系
hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
H-1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
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