"FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:2-3天換液1次
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒(méi)有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
6-T CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞
C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞
NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
3T3 J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞、G-401細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細(xì)胞、H-1581細(xì)胞、H6c7細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
LTEP-a-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BOWES細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
NBL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細(xì)胞系
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
THEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2細(xì)胞、NTC200細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞
HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞
U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
TK-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞
Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞
KU 19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞
624-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、aNK細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞
M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞
CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞
HCC-1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞
SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細(xì)胞系
KY-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細(xì)胞、H1688細(xì)胞、COV362細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞
mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS513細(xì)胞、293T/17細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
MDCK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
H-2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:67NR細(xì)胞、TK10細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞
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