"FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細胞系
細胞生長:貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:2-3天換液1次
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細胞系
細胞生長特性:懸浮生長
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
HEK293A細胞系相關產品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞
HN6細胞系相關產品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
6-T CEM細胞系相關產品:1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
SUM-52細胞系相關產品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
118MG細胞系相關產品:SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
C8166細胞系相關產品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
NS653細胞系相關產品:H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
SUD6細胞系相關產品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
3T3 J2細胞系相關產品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞
K562/ADP細胞系相關產品:SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
H2066細胞系相關產品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
74Int細胞系相關產品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
H1373細胞系相關產品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
Sci-1細胞系相關產品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
LTEP-a-2細胞系相關產品:BOWES細胞、SF 295細胞、ESC-410細胞
HEK-2細胞系相關產品:HCC0366細胞、NCI-SNU-449細胞、JiyoyeP-2003細胞
hTERT RPE-1細胞系相關產品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
End1/E6E7細胞系相關產品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
NG108-15細胞系相關產品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
HuLEC-5a細胞系相關產品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
KTCTL140細胞系相關產品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
KTCTL140細胞系相關產品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
C8166-CD4細胞系相關產品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
NCI-H1184細胞系相關產品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
NBL-2細胞系相關產品:NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
Hs822T細胞系相關產品:BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細胞系
YD-38細胞系相關產品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
Sc-1細胞系相關產品:RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
THEECs細胞系相關產品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
HNE-2細胞系相關產品:KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
Tu-212細胞系相關產品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
PE CA PJ34細胞系相關產品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關產品:18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
Hs840T細胞系相關產品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
OV2008細胞系相關產品:NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
BEND細胞系相關產品:SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
U-226AR1細胞系相關產品:H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
NCI-H1915細胞系相關產品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
EL4細胞系相關產品:MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
TK-10細胞系相關產品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
Mv1Lu細胞系相關產品:P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
HCC1954-BL細胞系相關產品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
MEF細胞系相關產品:OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
N-2a細胞系相關產品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
LNCaP細胞系相關產品:Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關產品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
KU 19-19細胞系相關產品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
624-mel細胞系相關產品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
M059K細胞系相關產品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
CAKI1細胞系相關產品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
HCC-1419細胞系相關產品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
SK-UT-1細胞系相關產品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
JURKAT E-61細胞系相關產品:MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
RS1細胞系相關產品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
HCC 2185細胞系相關產品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
87MG細胞系相關產品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關產品:Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
H-1436細胞系相關產品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
FDC-P1 Thawing小鼠正常骨髓細胞系
KY-270細胞系相關產品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
BSC1細胞系相關產品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
GP5d細胞系相關產品:SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
mIMCD3細胞系相關產品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關產品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
H2171細胞系相關產品:LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞
Ly8細胞系相關產品:Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞
U373細胞系相關產品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
MDCK-2細胞系相關產品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
MIHA細胞系相關產品:HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
H-2141細胞系相關產品:67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞
"