"BA/F3 Thawing小鼠原B細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
BA/F3 Thawing小鼠原B細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BA/F3 Thawing小鼠原B細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：圓形
KBM-7細胞系相關產(chǎn)品：KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
OCI-Ly18細胞系相關產(chǎn)品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
NCI-H2052細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
SNU1040細胞系相關產(chǎn)品：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
Bac1 2F5細胞系相關產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
H2342細胞系相關產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
G-402細胞系相關產(chǎn)品：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
AAV293細胞系相關產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
HCC-2935細胞系相關產(chǎn)品：746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
A 172細胞系相關產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
Tsup-1細胞系相關產(chǎn)品：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
SR細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
H 9細胞系相關產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、HEL 92.1.7細胞、Clone 166細胞
MCF-7B細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、NCI522細胞、HEB細胞
CAL 51細胞系相關產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
Hs863T細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞
NCIH1618細胞系相關產(chǎn)品：CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
MAEC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
H-1770細胞系相關產(chǎn)品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
H-1770細胞系相關產(chǎn)品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
BI-Mel細胞系相關產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
HOS TE 85細胞系相關產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
LYR細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
THPI細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
BA/F3 Thawing小鼠原B細胞系
MDA 435細胞系相關產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
SF-767細胞系相關產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
SW 756細胞系相關產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
KYSE-180細胞系相關產(chǎn)品：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
NCI747細胞系相關產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
KBM7細胞系相關產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
F-36P細胞系相關產(chǎn)品：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
SK-GT-2細胞系相關產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
LS-174T細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
BC-028細胞系相關產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
WM-239細胞系相關產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
MDA-MB-231細胞系相關產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
GM03190A細胞系相關產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
H-1395細胞系相關產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
HPAFII細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
High 5細胞系相關產(chǎn)品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
HCC2108細胞系相關產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
NPA'87細胞系相關產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
H-716細胞系相關產(chǎn)品：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
CP70細胞系相關產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
526細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞
YH細胞系相關產(chǎn)品：NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
Jurkat E6細胞系相關產(chǎn)品：JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞
PG-LH7細胞系相關產(chǎn)品：RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
DMS-153細胞系相關產(chǎn)品：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
OCI-LY-19細胞系相關產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
NG 108-15細胞系相關產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
HuH28細胞系相關產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
J82細胞系相關產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
BA/F3 Thawing小鼠原B細胞系
HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
Hs675T細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
EBC-1細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
HP615細胞系相關產(chǎn)品：Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
Strain KB細胞系相關產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
CEK細胞系相關產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
C32-mel細胞系相關產(chǎn)品：GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
CaEs17細胞系相關產(chǎn)品：X63Ag8-653細胞、SU-DHL-4細胞、B16/BL6細胞
Kelly細胞系相關產(chǎn)品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
KYSE-510細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
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