"SW954 Thawing人陰戶鱗癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SW954 Thawing人陰戶鱗癌細胞系
細胞生長:貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW954 Thawing人陰戶鱗癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、C666-1細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、HFL-1細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
SW954 Thawing人陰戶鱗癌細胞系
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
GM 2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
Hs675細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
MV4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
SW954 Thawing人陰戶鱗癌細胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
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