"MKN1 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
MKN1 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MKN1 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
C3H10T1/2CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞
HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細(xì)胞、TT細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞
2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293A細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞、NCM460細(xì)胞
NEC-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
MKN1 Thawing人胃癌細(xì)胞系
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
H2.35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
MLA144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA7細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞
JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞
P3-X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞
H-1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPECJ2細(xì)胞、K7M2細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞
HT-29/CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
MKN1 Thawing人胃癌細(xì)胞系
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞
HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞
95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞
190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
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