"A101D Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
A101D Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４-１：６傳代，２-３天換液１次。
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A101D Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
OCILY7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
LS174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、H-2444細胞、HPAF細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、HT clone H9細胞、C17.2細胞
A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
A101D Thawing人黑色素瘤細胞系
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
HPF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
A101D Thawing人黑色素瘤細胞系
NIH:OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
DMS 114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
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