"COLO 829 Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
COLO 829 Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO 829 Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、Okayama University Medical School-27細胞、D-283細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細胞、CL40細胞、SUM190PT細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
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Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
COLO 829 Thawing人黑色素瘤細胞系
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
CD-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
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