"HuP-T3 Thawing人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HuP-T3 Thawing人胰腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HuP-T3 Thawing人胰腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我常看到一個比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
UMRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
Hs-578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN 60細胞、JTC-39細胞、MLA-144細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、CEMC1細胞、SUM 159PT細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
HuP-T3 Thawing人胰腺癌細胞系
NKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
NCI-H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
Colon-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
HuH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
HuP-T3 Thawing人胰腺癌細胞系
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
TCMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
SUM102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞
CHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
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