"TOV-112D Thawing人上皮性卵巢癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
TOV-112D Thawing人上皮性卵巢癌細胞系
細胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代,3-4天換液1次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TOV-112D Thawing人上皮性卵巢癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
IA-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
FAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
SGC 7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞
IB-RS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
TOV112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
IB-RS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE細胞、COS-1細胞、NCI-SNU-878細胞
H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細胞、H-661細胞、SKES-1細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
TOV-112D Thawing人上皮性卵巢癌細胞系
SK-MEL-2-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
Hs-675-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
MH-22a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
H184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
T 84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
TOV-112D Thawing人上皮性卵巢癌細胞系
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
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