"OE19 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
OE19 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】1)掌握好細(xì)胞消化的時間,消化時間過短時,細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細(xì)胞生物學(xué)實驗,細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開一點(diǎn)孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OE19 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
有關(guān)實驗室細(xì)胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞
HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞
GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞
MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞
HT 1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
REC 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-4006細(xì)胞、U266B1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞
BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
HCa/16A3-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
OE19 Thawing人食管癌細(xì)胞系
T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
MLE 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
FHCRC subclone 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞
HCC-827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞
Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
NMCG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVSMC細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞
P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞
Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞
LAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
OE19 Thawing人食管癌細(xì)胞系
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞
Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細(xì)胞、F442-A細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞
VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞
251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
T-47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞、KMST6細(xì)胞
HLF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞
McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞
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