"RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書(shū),包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同,有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō)MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了;3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買(mǎi)的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,3-4天換液1次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題,客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō),針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過(guò)低,細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng);4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短:時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞死亡;時(shí)間過(guò)短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因,做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過(guò)驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng),傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個(gè)培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性:梭型和大的多核細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞
CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞
RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞
BMU-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞、SW 982細(xì)胞
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
A-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Raji細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBEo細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞
RMS 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞
NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
JHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 153細(xì)胞、KCL22細(xì)胞、675T細(xì)胞
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
KY-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細(xì)胞、H1688細(xì)胞、COV362細(xì)胞
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞
Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞
OCI-AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細(xì)胞、MC9細(xì)胞、SW 837細(xì)胞
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
MDA-MB-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞、H-1930細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBdSMC細(xì)胞、IM95細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞
COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞
Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞
YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞
H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞
624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
HEC-1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞
H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞
SCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
RGM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC_7860細(xì)胞、MDA436細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞
NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞
UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
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