"COR-L23 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
COR-L23 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COR-L23 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
我??吹揭粋€比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應該是網友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
A2780CP細胞系相關產品:SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
BHK21細胞系相關產品:MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
IBMF-7細胞系相關產品:HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
Hep3B細胞系相關產品:P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
Vero E6細胞系相關產品:HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
HBE細胞系相關產品:NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
GP5d細胞系相關產品:SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
SU-86-86細胞系相關產品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
SW527細胞系相關產品:R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
IOSE80UBC細胞系相關產品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
AU 565細胞系相關產品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
H1435細胞系相關產品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
NG108-15細胞系相關產品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
HOS TE85細胞系相關產品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
AML 12細胞系相關產品:Kit225 K6細胞、CTV1細胞、H1568細胞
BT 20細胞系相關產品:NCI-HUT-460細胞、RF/6A細胞、DK-MG細胞
LTEPa2細胞系相關產品:SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
FBHE細胞系相關產品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
H-1573細胞系相關產品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關產品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
THP 1細胞系相關產品:HUT-226細胞、C2C12細胞、KMS-26細胞
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WM35細胞系相關產品:A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
KRC Y細胞系相關產品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
TU 686細胞系相關產品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產品:HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
COR-L23 Thawing人肺癌細胞系
SK-CO-1細胞系相關產品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
NIH3T3細胞系相關產品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
293/EBNA細胞系相關產品:LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞
Hs 895 T細胞系相關產品:CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
NCIH1838細胞系相關產品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
NSC-34細胞系相關產品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
GL261細胞系相關產品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
TCMK-1細胞系相關產品:L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
INS-1細胞系相關產品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞
Molm 13細胞系相關產品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
VM Cub 1細胞系相關產品:INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
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Ha Fe細胞系相關產品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
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Hs 600.T細胞系相關產品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
C4-I細胞系相關產品:BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
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Tissue Culture-1細胞系相關產品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
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COR-L23 Thawing人肺癌細胞系
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