"NCI-H1373 Thawing人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
NCI-H1373 Thawing人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:4傳代;2-3天換液1次。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周?chē)?,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H1373 Thawing人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專(zhuān)題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見(jiàn),可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來(lái),細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題,很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到,雖然通過(guò)其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
NE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞
SuDHL 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、CATHa細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞
293 F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞、U87細(xì)胞
PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
NL20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN m5F細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、Fu97細(xì)胞
FT-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
NCI-H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞
Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
LLCMK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
NCI-H1373 Thawing人肺癌腺癌細(xì)胞系
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
LS 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1080細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞、H-661細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
UMUC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞、MN-60細(xì)胞
LNCaP FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞、H1092細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
J774 A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895.T細(xì)胞、C-26細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
H-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH91細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞、KLM1細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
TCMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-02細(xì)胞、LM1細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
NCI-H1373 Thawing人肺癌腺癌細(xì)胞系
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
WPMY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TJ905細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞
COS-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞、TE-9細(xì)胞
IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
E.L.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞
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