"HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:最初認(rèn)為這個(gè)細(xì)胞源自喉上皮癌,但隨后通過(guò)同功酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn),起源細(xì)胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒(méi)有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開(kāi)關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過(guò)少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過(guò)程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周?chē)膽腋〖?xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過(guò)細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過(guò)調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來(lái)調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細(xì)胞系
常見(jiàn)培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時(shí),有時(shí)即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對(duì)各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無(wú)對(duì)抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會(huì)使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對(duì)細(xì)胞本身也有一定影響,因此為避免誘導(dǎo)抗藥細(xì)菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細(xì),并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無(wú)菌才能使用。同時(shí),在無(wú)菌過(guò)濾操作中,隨著濾過(guò)體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過(guò)濾的液體進(jìn)行檢測(cè)。定期對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動(dòng)的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過(guò)的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí),1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí),可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液(92%血清)2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量?jī)龃嬉?,用吸管吹打制成?xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過(guò)3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞
HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細(xì)胞系
LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞
BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
STO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、H-146細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
SPC-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細(xì)胞、BC-024細(xì)胞、751細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞
NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞
DSL-6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-420細(xì)胞、MDA175細(xì)胞、A427細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
EBNA293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
HEp-2 cell line人喉表皮樣癌細(xì)胞系
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞
Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞
HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、H-187細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
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