"NCI-H1975 cell line人肺腺癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞于1988年七月建株。組織提供者是一位非吸煙人士。
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1975 cell line人肺腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
NCI-H1975 cell line人肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞
L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
NCI-H1975 cell line人肺腺癌細胞系
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
NCI-H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
NCI-H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細胞、L540細胞、74Int細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞
KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
HCT-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
NCI-H1975 cell line人肺腺癌細胞系
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
Cates 1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP2細胞、NEC-8細胞、Hs 27細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM1215細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、ZR-75-30細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、JVM-2細胞、293/EBNA細胞
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