"NCI-H1755 cell line人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1755 cell line人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
NCI-H1755 cell line人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
HTori:3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞、SCC7細(xì)胞
BEAS-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞
BC-020細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞、B-16細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
MOLT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
NCI-H1755 cell line人肺癌細(xì)胞系
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞
MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞
GFP-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細(xì)胞、AML 12細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
LA-N-6(OAN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞
C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細(xì)胞、ATN1細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞
P3J-HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
PLC/PRF/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
GM3569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
MEG-01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA12細(xì)胞、SW900細(xì)胞、H283細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
MDA-MB-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞
NCI-H1755 cell line人肺癌細(xì)胞系
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細(xì)胞、U14細(xì)胞、NCM460細(xì)胞
BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、OSA細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、B16F10細(xì)胞
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