"SK-LMS-1 fibroblast cells人陰戶平滑肌肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
UACC-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞
TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
SK-LMS-1 fibroblast cells人陰戶平滑肌肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:5傳代,2-3天換液1次。
SU.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam-2細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞
NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-LMS-1 fibroblast cells人陰戶平滑肌肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞
KLM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞
SK-LMS-1 fibroblast cells人陰戶平滑肌肉瘤細(xì)胞系
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞
U-2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞
NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞
CT26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞
G292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細(xì)胞、HS940細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞
RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞
CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞
Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
FRO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞、H716細(xì)胞
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
B 95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細(xì)胞、KBM5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
RCC-JF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、T47D細(xì)胞、EFM19細(xì)胞
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
HT144-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞
SK-LMS-1 fibroblast cells人陰戶平滑肌肉瘤細(xì)胞系
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7404細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、GES1細(xì)胞
Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251_MG細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細(xì)胞、Z310細(xì)胞、HSC6細(xì)胞
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