"MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:MRC-5細(xì)胞系來(lái)自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細(xì)胞老化前能傳代42~46個(gè)倍增時(shí)間。
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞
R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi),培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:5傳代;每周1-2次。
MDA-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞
MHCC 97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL2細(xì)胞、EL-4細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞
SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
CHP212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細(xì)胞、T-98細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞
SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細(xì)胞系
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞
BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞
COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞
AG 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞
MPP89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞
CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞
SGC7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞
BHP 10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W133細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
Hs 888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞
Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
P 815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、EU-3細(xì)胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纖維細(xì)胞系
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY-1細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
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