"RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞
b.End3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細(xì)胞、C1498細(xì)胞、8305-C細(xì)胞
CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞
SKMEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞
OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細(xì)胞系
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
Hi-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1438細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
GDM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞
CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞
MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞
BIC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細(xì)胞、TR 146細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
BJA-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、TR146細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
4T1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、BV-2細(xì)胞、GM03320細(xì)胞
NCI-H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
RPMI-8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細(xì)胞、SW527細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞
OCI Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細(xì)胞系
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細(xì)胞、KMB17細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞
SK MEL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 420細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
"