"A2780/Taxol epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
A2780/Taxol epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Cates-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A2780/Taxol epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞
H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞
N9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
HRVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞
HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
A2780/Taxol epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
UCLA NPA871細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞
Lewis-Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
SKO-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞、HKBML細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
LLC-PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細(xì)胞、RBE4細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
NCIH727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞、SW1573細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
HPC-Y5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131A細(xì)胞、H1694細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞
211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、TO175T細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞
A2780/Taxol epithelioid cells人卵巢癌細(xì)胞系
TJ905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
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