"MC3T3-E1 Subclone 4 epithelioid cells小鼠原成骨細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
細胞生長：貼壁
MC3T3-E1 Subclone 4 epithelioid cells小鼠原成骨細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MC3T3-E1 Subclone 4 epithelioid cells小鼠原成骨細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
MC3T3-E1 Subclone 4 epithelioid cells小鼠原成骨細胞系
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
P3/ag細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
B-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞
COLO 699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
NCI H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
HTR8svn細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
PVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
SK-LU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
H-1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞
GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
MC3T3-E1 Subclone 4 epithelioid cells小鼠原成骨細胞系
SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
LAD2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細胞、OVCA5細胞、Hepatoma-22細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、HFLS-OA細胞、NCIH1770細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、B10BR細胞、LN 229細胞
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