"NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
TB1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_HEP1細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
HEK 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
HuT 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
B16 subline B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
CHL/IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞
HCPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞
MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞
HeLa229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM-1細(xì)胞、CA-46細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞
NCI-H1668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
WEHI3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
DH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
P3-X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細(xì)胞、JKT1細(xì)胞、SJSA細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
HGF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
SUPB-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoN細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞
BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞
QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、SW13細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、H2170細(xì)胞
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