"SW527 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
細胞生長:貼壁
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
SW962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
P3/ag細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
CMK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
SW527 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、H1672細胞、CHO細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat, August 3, 1983細胞、ATC241細胞、CSQT-2細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、SK LU 1細胞、NCTC 929細胞
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