"SK-LU-1 Thawing人低分化肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系源于一位60歲的白人女性患者的肺腺癌組織。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
SK-LU-1 Thawing人低分化肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長,但時(shí)間長之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí),使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個(gè)別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2次。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動(dòng)作要輕,以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-LU-1 Thawing人低分化肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
我??吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細(xì)胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
GDM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
PANC0403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細(xì)胞、RGE細(xì)胞、A704細(xì)胞
Ect1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3-L1細(xì)胞、H-676B細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞
NL20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、NE1細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細(xì)胞、7860細(xì)胞、CAL120細(xì)胞
SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細(xì)胞、7860細(xì)胞、CAL120細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
SK-LU-1 Thawing人低分化肺腺癌細(xì)胞系
HIT T-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞
526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
32D clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
UMRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
VK2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuperTube細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
Mel RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFC細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞、H2135細(xì)胞
HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞
KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
SK-LU-1 Thawing人低分化肺腺癌細(xì)胞系
RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
PC-9S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞
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