"VA-ES-BJ Thawing人上皮樣肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
VA-ES-BJ Thawing人上皮樣肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，每周２次
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
VA-ES-BJ Thawing人上皮樣肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、F442A細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞
EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
VA-ES-BJ Thawing人上皮樣肉瘤細(xì)胞系
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
SK-N-BE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2023細(xì)胞、NEC8細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞
ASH-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1703細(xì)胞、SW756細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞
SKMel-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞
HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
VA-ES-BJ Thawing人上皮樣肉瘤細(xì)胞系
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
GM03570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
H-2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細(xì)胞、GTL16細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
CPA47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞
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