"SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液1-2次
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
OVCAR 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細(xì)胞、HIEC細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
LM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞、149PT細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
T.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU5細(xì)胞、H1838細(xì)胞、KNS81細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
Caco 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞、FRO細(xì)胞
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞
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