"HCC2218 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HCC2218 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：每周換液２—３次
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC2218 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞
KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
PK(15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
HCC2218 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞
MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞
RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
NCIH727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞、SW1573細(xì)胞
MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
HCC2218 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
AAV-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P19細(xì)胞、A1847細(xì)胞、HECV細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞
343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
PE/CA-PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT-T15細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞
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