"KNS-42 Thawing人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KNS-42 Thawing人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KNS-42 Thawing人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：多邊形
526mel細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
CAMA1細胞系相關產(chǎn)品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
PA1細胞系相關產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
C-643細胞系相關產(chǎn)品：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
NCI-H1915細胞系相關產(chǎn)品：NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
HT(H9)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
MonoMac 6細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
Mahlavu細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
Ly3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
TGBC11T細胞系相關產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
HCC0044細胞系相關產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
H87細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細胞、SUM149PT細胞、Hs-578T細胞
HuH28細胞系相關產(chǎn)品：IHH4細胞、Hs 274細胞、CAL39細胞
HFL細胞系相關產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
Bac 1.2F5細胞系相關產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
MLA 144細胞系相關產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
RIN-m 14B細胞系相關產(chǎn)品：SW-1783細胞、SHG44細胞、SupB15W細胞
MDAMB175VII細胞系相關產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
MDAMB175VII細胞系相關產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
L-WRN細胞系相關產(chǎn)品：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
CCD-841-CoN細胞系相關產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
UCLA-SO-14細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
Raji細胞系相關產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
KNS-42 Thawing人腦膠質(zhì)瘤細胞系
SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
BT-474細胞系相關產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
SNU-620細胞系相關產(chǎn)品：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
COR-L105細胞系相關產(chǎn)品：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
CD-18細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
RN細胞系相關產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
RS1細胞系相關產(chǎn)品：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
SW48細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
SUM 159細胞系相關產(chǎn)品：C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
WM266-4細胞系相關產(chǎn)品：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞
H.Ep. #2細胞系相關產(chǎn)品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
YTMLC-90細胞系相關產(chǎn)品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
GRSL細胞系相關產(chǎn)品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
McA-RH 8994細胞系相關產(chǎn)品：A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞
Keio University-19-19細胞系相關產(chǎn)品：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
HCO細胞系相關產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
Hx-147細胞系相關產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關產(chǎn)品：SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
E304細胞系相關產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
RS4;11細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
LNT-229細胞系相關產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
SCC9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
RAW2647細胞系相關產(chǎn)品：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
RC-K8細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
DLD-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
HGMC細胞系相關產(chǎn)品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
MC-26細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
KNS-42 Thawing人腦膠質(zhì)瘤細胞系
MCF12A細胞系相關產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
M-O7e細胞系相關產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
SPC-A1細胞系相關產(chǎn)品：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
SNK1細胞系相關產(chǎn)品：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
SCC90細胞系相關產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
L428細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
H1882細胞系相關產(chǎn)品：HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
LNCaP-FGC細胞系相關產(chǎn)品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞
H596細胞系相關產(chǎn)品：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
COV 504細胞系相關產(chǎn)品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
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