"SF126 Thawing人腦瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞來(lái)源于星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤；膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）陰性；可以特異地結(jié)合β-內(nèi)啡肽。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SF126 Thawing人腦瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SF126 Thawing人腦瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞
CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞
Line 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞
OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞
PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞
KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞
RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞
AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
UPCISCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細(xì)胞、W256細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞
Panc-10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
SF126 Thawing人腦瘤細(xì)胞系
PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞
GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞
CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞
LAD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293FT細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞
OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
SF126 Thawing人腦瘤細(xì)胞系
HFE-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞
mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞
MDA-MB-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞
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