"Daoy Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Daoy Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Daoy Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：多邊形
LLCMK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞
P 3 HR 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、OS-RC-2細胞、TE8細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細胞、SK-ES細胞、UMNSAH/DF-1細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
Panc-8_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
Daoy Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
CAL27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
PaTu8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
A2780/Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
Daoy Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
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