"D283 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
D283 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導(dǎo)致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２-３次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
D283 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮細胞的多細胞聚集體，和一些貼壁細胞
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
OCUM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
LA-N-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
RPMI 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
Hs 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細胞、SKOV-433細胞、SW-480細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細胞、IR983F細胞、NCI-H650細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
D283 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞
NE1-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
EC109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
D283 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
Hs27F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
NCIH211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
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