"GOTO Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
GOTO Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１０^４ cells/ml
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GOTO Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
ZR7530細胞系相關產(chǎn)品：Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞
HCC-1599細胞系相關產(chǎn)品：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
DLD 1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
H3255_DA細胞系相關產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
NCIH2172細胞系相關產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
MLM細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
TOV-112細胞系相關產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
Mink Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
X63-AG 8.653細胞系相關產(chǎn)品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
H1650細胞系相關產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
ACCM細胞系相關產(chǎn)品：Rat Skin 1細胞、C6661細胞、WiDrTC細胞
PANC3.27細胞系相關產(chǎn)品：BT-B細胞、PLA802細胞、VP267細胞
GM02219C細胞系相關產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
2008細胞系相關產(chǎn)品：T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
MDA231細胞系相關產(chǎn)品：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
SW982細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞
KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞
SW839細胞系相關產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
NCI-H69C細胞系相關產(chǎn)品：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
LS411N細胞系相關產(chǎn)品：H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞
SKM-1細胞系相關產(chǎn)品：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
GOTO Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
KLN205細胞系相關產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
NCIH2196細胞系相關產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
NPC-TW 01細胞系相關產(chǎn)品：SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
MCF7ADR細胞系相關產(chǎn)品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
SK-MES-1細胞系相關產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
H-774細胞系相關產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
Hs 819.T細胞系相關產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
NBL-3細胞系相關產(chǎn)品：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
HCC0202細胞系相關產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
CAL 78細胞系相關產(chǎn)品：SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
RD-2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
EAHY-926細胞系相關產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
OUMS-27細胞系相關產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關產(chǎn)品：Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
COLO320HSR細胞系相關產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
HCC202細胞系相關產(chǎn)品：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
NCI-N87細胞系相關產(chǎn)品：NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
HRCEC細胞系相關產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關產(chǎn)品：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
NCI-H1650細胞系相關產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
B16BL-6細胞系相關產(chǎn)品：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
SKNEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
ARH77細胞系相關產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
IHH-4細胞系相關產(chǎn)品：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
GOTO Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
H-9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
A427細胞系相關產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
A427細胞系相關產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
Mino細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
B35細胞系相關產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
LI7細胞系相關產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
NP69細胞系相關產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
MC57G細胞系相關產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
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