"HT-1376 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HT-1376 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調整為靜止期,或者慢速生長期,恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HT-1376 Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Panc 05.04細胞系相關產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
G-361細胞系相關產(chǎn)品:U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞
H1755細胞系相關產(chǎn)品:Panc_04_03細胞、ME180細胞、MDAPCa-2b細胞
6-10B細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
JROECL 21細胞系相關產(chǎn)品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
QGP1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
Reuber H35細胞系相關產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
LIPF155C細胞系相關產(chǎn)品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
B-CPAP細胞系相關產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
HSMC細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
HSC-4細胞系相關產(chǎn)品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
3AA細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
A-427細胞系相關產(chǎn)品:D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
hTERTHME1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
LTEP a2細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細胞、KMS-18細胞、NCIH1944細胞
NCIH2081細胞系相關產(chǎn)品:74Int細胞、L540細胞、L 363細胞
W256細胞系相關產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
IGR.OV1細胞系相關產(chǎn)品:HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
COR-L26細胞系相關產(chǎn)品:EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
ChaGo K-1細胞系相關產(chǎn)品:UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞
C6661細胞系相關產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
U-373 MG細胞系相關產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
MN-60細胞系相關產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
138MG細胞系相關產(chǎn)品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
SJRH 30細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
HT-1376 Thawing人膀胱癌細胞系
IGROV-1細胞系相關產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
Hs-611-T細胞系相關產(chǎn)品:HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
NU-GC-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
HUVEC細胞系相關產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
J-774A.1細胞系相關產(chǎn)品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
RKN細胞系相關產(chǎn)品:Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞
H1618細胞系相關產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
bEND.3細胞系相關產(chǎn)品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
PNT1/A細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
ACCM細胞系相關產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產(chǎn)品:PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞系相關產(chǎn)品:PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
NCI-SNU-407細胞系相關產(chǎn)品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
EU-4細胞系相關產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
RA.1細胞系相關產(chǎn)品:TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
H524細胞系相關產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
GM03571細胞系相關產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
COLO201細胞系相關產(chǎn)品:Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
COR-L 105細胞系相關產(chǎn)品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
V79-1細胞系相關產(chǎn)品:MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
Hs 636 T細胞系相關產(chǎn)品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
RBL 2H3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
MC 116細胞系相關產(chǎn)品:GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
H1373細胞系相關產(chǎn)品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關產(chǎn)品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
H661細胞系相關產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
H2227細胞系相關產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
NS-20Y細胞系相關產(chǎn)品:CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
5-8F細胞系相關產(chǎn)品:Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
HS-766-T細胞系相關產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
SNU-16細胞系相關產(chǎn)品:2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
HT-1376 Thawing人膀胱癌細胞系
HCC1937細胞系相關產(chǎn)品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
NCI-SNU-620細胞系相關產(chǎn)品:NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
PC10細胞系相關產(chǎn)品:MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
WEHI 231細胞系相關產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
HSC-6細胞系相關產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
H-1975細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
MDA330細胞系相關產(chǎn)品:Pt K2細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞、ROS-17/2.8細胞
NS20-Y細胞系相關產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
HA1800細胞系相關產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
OCI AML4細胞系相關產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
HS578T細胞系相關產(chǎn)品:MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
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