"BRL Thawing大鼠肝細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
BRL Thawing大鼠肝細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BRL Thawing大鼠肝細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
kms 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞、H-1155細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、TE-5細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
BRL Thawing大鼠肝細(xì)胞系
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
B16 subline B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞
High-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH446細(xì)胞、CL-40細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
OV-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C127細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞
HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞
QGP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
GM03570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
Becker細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI38細(xì)胞、L cell line細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細(xì)胞、YES2細(xì)胞、SNU368細(xì)胞
Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞
MDA-MB 468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞
HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞
BRL Thawing大鼠肝細(xì)胞系
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞
OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
PLC/PRF/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
PANC-02-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、MeWo細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
WILL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-128細(xì)胞、CORL279細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞
RK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
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