"IEC-18 Thawing大鼠回腸細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
IEC-18 Thawing大鼠回腸細胞系
細胞生長:貼壁
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數;2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
IEC-18 Thawing大鼠回腸細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經驗總結,這里說一些我個人的經驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結經驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要),關鍵所在是細胞來源,血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
FHL124細胞系相關產品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
8305-C細胞系相關產品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
PK-136細胞系相關產品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
P3X63細胞系相關產品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
HMEC-1細胞系相關產品:LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
SACC-LM細胞系相關產品:HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關產品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
4T1細胞系相關產品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
HP615細胞系相關產品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
U343MG細胞系相關產品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
CA-OV-3細胞系相關產品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
SK-MEL-3細胞系相關產品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
PC10細胞系相關產品:MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
SW403細胞系相關產品:V-79細胞、EC-109細胞、LS174細胞
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U343細胞系相關產品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
SKMEL28細胞系相關產品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
SK-Mel1細胞系相關產品:PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
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PC2細胞系相關產品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
A172細胞系相關產品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
IEC-18 Thawing大鼠回腸細胞系
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SU-DHL-6細胞系相關產品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
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32D clone3細胞系相關產品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
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HuT 78細胞系相關產品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
LAN-5細胞系相關產品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
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SUM52細胞系相關產品:PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
CCD 966SK細胞系相關產品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
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IEC-18 Thawing大鼠回腸細胞系
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