"AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：AN３CA細(xì)胞建系于１９６４年。它衍生于子宮內(nèi)膜癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織，具有癌細(xì)胞的基本特性，能在體外長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)，接種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生明顯腫瘤。但細(xì)胞的生物學(xué)特性及超微結(jié)構(gòu)尚未深入研究，僅發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞系促黑激素合成為陰性。細(xì)胞常用于人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生物學(xué)及其相關(guān)特性研究。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
NBL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞
NW38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
SW1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞
SW1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
SK-MEL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞
BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
OCI-Ly 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
rUCMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK.EBNA細(xì)胞、SB細(xì)胞、ME16C細(xì)胞
NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
Reh細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA922細(xì)胞、BT-474細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞
NCI-SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞
MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
NCIH3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細(xì)胞、A-375細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
TE-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞
SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞
NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞
SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞
AN3-CA Thawing人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
HCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞
Lu-99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞
R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
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