"HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
細胞背景資料：該細胞由E.V.Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立，培養(yǎng)出來的細胞染色體組型在第７代時就不正常；電鏡照片顯示有微絲、張力原纖維和橋粒；Southern轉移表明有整合型SV４０病毒基因，當作正常細胞。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
細胞生長：貼壁
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經８０～１００目篩網過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
PTK-2細胞系相關產品：MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
MFE280細胞系相關產品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
KE 37細胞系相關產品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
CCRF/CEM細胞系相關產品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
SKNDZ細胞系相關產品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
Panc-1-P細胞系相關產品：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
A549細胞系相關產品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
SKO3細胞系相關產品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
RD-2細胞系相關產品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
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SuDHL 8細胞系相關產品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
DSL6A/C1細胞系相關產品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
Hep2細胞系相關產品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
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CCD841CoN細胞系相關產品：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞
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CORL51細胞系相關產品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
Ca-Ski細胞系相關產品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
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HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
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GB1細胞系相關產品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
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CHOK1細胞系相關產品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
GOS-3細胞系相關產品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
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ATC241細胞系相關產品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
RenCa細胞系相關產品：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
NCI-H1092細胞系相關產品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產品：H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
5637細胞系相關產品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
RINm-5F細胞系相關產品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
HSF2細胞系相關產品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關產品：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
NCI-H78細胞系相關產品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
MDAMB134細胞系相關產品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
SNT8細胞系相關產品：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關產品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
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