"HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞由E.V.Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立，培養(yǎng)出來的細(xì)胞染色體組型在第７代時就不正常；電鏡照片顯示有微絲、張力原纖維和橋粒；Southern轉(zhuǎn)移表明有整合型SV４０病毒基因，當(dāng)作正常細(xì)胞。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
我常看到一個比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GMK,BSC-1細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞
PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
GM 637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL 1細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞、HCT15細(xì)胞
HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
ATC241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
HBL-100 Thawing人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞、NCI747細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
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