"22Rv1 Thawing人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細胞系。此細胞系表達前列腺特異抗原。二羥基睪丸脂酮輕微刺激細胞生長,經westernblot檢測溶解產物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應。EGF刺激細胞生長,但TGFβ-1不能抑制細胞生長。該細胞在裸鼠中成瘤。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
22Rv1 Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數;2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
22Rv1 Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數實驗,比如病毒包裝,對細胞代數,對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
RSC96細胞系相關產品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
HCT-116細胞系相關產品:TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
AN3-CA細胞系相關產品:UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
A2780-CP細胞系相關產品:Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
SKNEP-1細胞系相關產品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
OV1/P細胞系相關產品:CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
SK-MES細胞系相關產品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
Ly10細胞系相關產品:SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
L6565細胞系相關產品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
HSC6細胞系相關產品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
Farage OL細胞系相關產品:F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
MG-HU-3細胞系相關產品:TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
CBRH-7919細胞系相關產品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
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H-2009細胞系相關產品:NTera 2細胞、SUM 102細胞、NCTC 1469細胞
AE1201細胞系相關產品:COLO 357細胞、PM6細胞、SK-MEL-MeWo細胞
293S細胞系相關產品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
PANC-10-05細胞系相關產品:SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
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Natural Killer-92細胞系相關產品:BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
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NCIH841細胞系相關產品:C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
BRL-3A細胞系相關產品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
Hopkins-92細胞系相關產品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
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22Rv1 Thawing人前列腺癌細胞系
B 95.8細胞系相關產品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
HEL 299細胞系相關產品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
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HT-1376細胞系相關產品:SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
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CoCL3細胞系相關產品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
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GM346細胞系相關產品:LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
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PIG3細胞系相關產品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
SUDHL-6細胞系相關產品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
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Tn-5細胞系相關產品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
Hs739T細胞系相關產品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
HCC1954-BL細胞系相關產品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
Becker細胞系相關產品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
8305-C細胞系相關產品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
Panc 08.13細胞系相關產品:AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
COR-L 105細胞系相關產品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
KCL-22細胞系相關產品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
HS-683細胞系相關產品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
U-251_MG細胞系相關產品:SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
SKO-007細胞系相關產品:HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
22Rv1 Thawing人前列腺癌細胞系
U138-MG細胞系相關產品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
Malme-3 M細胞系相關產品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
T-ALL1細胞系相關產品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
FU-97細胞系相關產品:NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
NCI H82細胞系相關產品:SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
SN4741細胞系相關產品:Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
HCC-1806細胞系相關產品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
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Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關產品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
CPA47細胞系相關產品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關產品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
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