"VCaP Thawing人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:1997從一位不受激素影響的前列腺癌患者脊椎轉(zhuǎn)移灶中建立了這株細胞。先在小鼠中進行異種移植傳代,隨后進行體外培養(yǎng)。體內(nèi)及體外都對雄性激素敏感。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
VCaP Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經(jīng)驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導(dǎo)致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
VCaP Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
OCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
NCIH510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
LAD2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
MDCC MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細胞、MLFC細胞、Mink Lung細胞
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細胞、MonoMac6細胞、SNU484細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
Kit-225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
VCaP Thawing人前列腺癌細胞系
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
KNS62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
MHCC97H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
YH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
VCaP Thawing人前列腺癌細胞系
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
Lewis-Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
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