"SK-N-SH Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:SK-N-SH細胞系由J.L.Bieder建系,它與SK-N-MC所不同的是倍增時間較長且多巴胺-β-羥基酶水平較高。 SK-N-SH在細胞介導的細胞毒性試驗中用作靶細胞系。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SK-N-SH Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SK-N-SH Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性:懸浮生長
我常看到一個比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、SNK6細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH209細胞、MV4-11細胞、CV-1細胞
H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞
VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
SK-N-SH Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
TCam 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
Kit 225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
KP4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
16-HBE14o細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
SKGT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
RC92A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞
NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
SK-N-SH Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
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