"SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:據(jù)報道,該細胞的密度可高達1×106cells/cm2,具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長:貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細胞時,發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因導致,我們該怎么進行解決?以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題,總結的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細胞裂解,推薦的解決方案:可預期到一定量的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長,存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
NCI-H2444細胞系相關產(chǎn)品:MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
COS-1細胞系相關產(chǎn)品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
TEC細胞系相關產(chǎn)品:BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
Sc-1細胞系相關產(chǎn)品:RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
NCI-441細胞系相關產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
SHG 44細胞系相關產(chǎn)品:HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
OCI-LY-10細胞系相關產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
MTC-TT細胞系相關產(chǎn)品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞
HIEC-6細胞系相關產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
IOSE 80細胞系相關產(chǎn)品:H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
Ramos細胞系相關產(chǎn)品:CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
HANK細胞系相關產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
RGM1細胞系相關產(chǎn)品:C1R細胞、PANC3.27細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
NCI-SNU-878細胞系相關產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、BLO-11細胞、HOPC細胞
UT7細胞系相關產(chǎn)品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
HCC95細胞系相關產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
Molm 14細胞系相關產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
Panc-02細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞
NCIH548細胞系相關產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
NCIH548細胞系相關產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
WERI-Rb 1細胞系相關產(chǎn)品:C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
MHCCLM3細胞系相關產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Colo-201細胞系相關產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
SK-MEL24細胞系相關產(chǎn)品:IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
H-1155細胞系相關產(chǎn)品:143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞
PIG3細胞系相關產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
LU451細胞系相關產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
231-luc細胞系相關產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
CAL33細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
H-1734細胞系相關產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
COLO-741細胞系相關產(chǎn)品:HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
MODE-K細胞系相關產(chǎn)品:RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
NCIADRRES細胞系相關產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
HOP62細胞系相關產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
LAPC4細胞系相關產(chǎn)品:EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
KYSE 30細胞系相關產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
LM TK negative細胞系相關產(chǎn)品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
SKNBE2C細胞系相關產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
SkChA-1細胞系相關產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
SKMEL3細胞系相關產(chǎn)品:H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
RPMI no 8226細胞系相關產(chǎn)品:NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
HS-683細胞系相關產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
GalK1細胞系相關產(chǎn)品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
HANK-1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
HEK-293-F細胞系相關產(chǎn)品:201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
G401細胞系相關產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
TW01細胞系相關產(chǎn)品:WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
TE 32.T細胞系相關產(chǎn)品:SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
NCI-H-69細胞系相關產(chǎn)品:DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
T-HEECs細胞系相關產(chǎn)品:QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
H1618細胞系相關產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
SH-SY5Y Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
V79-4細胞系相關產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
Co 115細胞系相關產(chǎn)品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
NCIH345細胞系相關產(chǎn)品:COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
HuPT3細胞系相關產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
CCRF細胞系相關產(chǎn)品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
KOPN8細胞系相關產(chǎn)品:HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
BBE細胞系相關產(chǎn)品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
SRS-82細胞系相關產(chǎn)品:BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
LC2/Ad細胞系相關產(chǎn)品:RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
U87-MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
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