"KB Thawing口腔表皮樣癌細胞系
細胞背景資料：最初認為這個細胞源自口腔表皮癌，但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn)，起源細胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 有報告稱KB細胞含有人乳頭狀瘤病毒１８ (HPV-１８)序列。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KB Thawing口腔表皮樣癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KB Thawing口腔表皮樣癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
NUGC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞
H19-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
P3/ag細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
HTh74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、OsA-CL細胞、NB-9細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細胞、VAESBJ細胞、JB6Cl30細胞
253JBV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
D562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
KB Thawing口腔表皮樣癌細胞系
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
751-NA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
H-1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
HLEB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
Hs27F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
SKCO 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
RT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
HRMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
TE3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
H-1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
KB Thawing口腔表皮樣癌細胞系
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
LA-N-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
DSL-6A-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
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