"NB4 Thawing急性早幼粒細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NB4 Thawing急性早幼粒細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NB4 Thawing急性早幼粒細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內預熱；２)用７５％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太??；５)準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內；７)從培養(yǎng)箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
M4e細胞系相關產品：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
PF-382細胞系相關產品：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
WIL2 Secreting細胞系相關產品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
CHL-CL-11細胞系相關產品：AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
COLO320 DM細胞系相關產品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
HuT 102細胞系相關產品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
SCC-1395細胞系相關產品：mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關產品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
L-Wnt3A細胞系相關產品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
IPEC1細胞系相關產品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
FAT細胞系相關產品：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
CL34細胞系相關產品：HuP-T4細胞、M4e細胞、Molm 13細胞
Mv1Lu細胞系相關產品：P3X63-Ag8.653細胞、UPCI:SCC90細胞、HcerEpic細胞
BPH1細胞系相關產品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
OVCAR-433細胞系相關產品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
Huh7.5細胞系相關產品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
INS1細胞系相關產品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
OCI-AML3細胞系相關產品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
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Hs 445細胞系相關產品：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞
HCT-116細胞系相關產品：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
Mv 1 Lu細胞系相關產品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
Huh-7.5細胞系相關產品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
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ST細胞系相關產品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
SaOS細胞系相關產品：EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞
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JB6 Cl 30細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
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Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關產品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
P3/X63-Ag8細胞系相關產品：MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞
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C 6細胞系相關產品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
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NB4 Thawing急性早幼粒細胞系
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