"SW480 Thawing人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：SW４８０源自一位５１歲白人男性患者的原位直腸腺癌，而SW６２０源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細胞CSAp和直腸抗原３陰性；角蛋白陽性；p５３基因第２７３位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，３０９位密碼子的C→T突變導致Pro→Ser替代；細胞p５３蛋白表達水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性；未檢測到癌基因N-myc的表達；不表達Matrilysin（一種與腫瘤侵襲相關(guān)的金屬蛋白酶）。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代，１-２天換液一次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
LI7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、HCC0827細胞、A-549細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細胞、NCI-H2106細胞、SO-Rb 50細胞
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
BCaP-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細胞系
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
G-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
OVCAR420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
C81-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞
MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
Vero E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
MHH-CALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細胞系
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
ECC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
769-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
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