"Hs 445 Suspended人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣

貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長，此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。

細(xì)胞生長：懸浮

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Hs 445 Suspended人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。

H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞

NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞

Walker-256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

BNL CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞

IPLB-Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞

Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

Hs 445 Suspended人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書

傳代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細(xì)胞懸液接種１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml/部位，＞１０(６)細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對穩(wěn)定的時(shí)間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１×１０(６)腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７-１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/div>