"RL-65 Adherent大鼠肺上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
TE13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？與CO２一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定；２)酸鈉的作用是什么？酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為５０mM，-２０℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為１mM；３)加入HEPES有何好處？培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽，它可提供營養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer，加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH７.２-７.６條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為１M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培養(yǎng)基中；４)紅的作用是什么？紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色；５)谷酰胺的作用是什么？幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后，可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-２０℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基４度冰箱儲存兩周以上時，應(yīng)重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分裝使用，-２０℃保存。使用時，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為２mM培養(yǎng)基。
STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
HUCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
A375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細胞系
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
HCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
IBRS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
IHH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
HCC0038細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細胞系
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
MOLP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
A-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
UMUC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、NCI-H358細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細胞、SuperTube細胞、H-1770細胞
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細胞、MAVER-1細胞、T 98 G細胞
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