"RL-65 Adherent大鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代24h-48h處于對(duì)數(shù)期的細(xì)胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細(xì)胞沉淀；用血清重懸細(xì)胞沉淀，用血球計(jì)數(shù)板或者細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；配制細(xì)胞凍存液，將凍存液加到細(xì)胞液中，吹打混勻，控制細(xì)胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細(xì)胞懸液按照1ml/支分裝至已標(biāo)記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細(xì)胞移至液氮中長(zhǎng)期保存。凍存管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細(xì)胞凍存時(shí)細(xì)胞狀態(tài)不佳，會(huì)嚴(yán)重影響復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞的活率。一般選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存前一天細(xì)胞進(jìn)行換液；消化過度也會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細(xì)胞時(shí)為按照溫度梯度進(jìn)行操作，會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞活率。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
KBM-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LN-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
MTEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞、HS-294細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
幾種實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？與CO２一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定；２)酸鈉的作用是什么？酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為５０mM，-２０℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為１mM；３)加入HEPES有何好處？培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽，它可提供營(yíng)養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES是一種很強(qiáng)的Buffer，加入HEPES能使細(xì)胞培養(yǎng)基在PH７.２-７.６條件下緩沖能力增強(qiáng)。Hepes的貯存液濃度一般為１M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培養(yǎng)基中；４)紅的作用是什么？紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色；５)谷酰胺的作用是什么？幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-２０℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基４度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來量的谷酰胺。試驗(yàn)操作中常配制高濃度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分裝使用，-２０℃保存。使用時(shí)，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為２mM培養(yǎng)基。
STO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1092細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、H-146細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞
SUM149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細(xì)胞、PA317細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞
NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細(xì)胞系
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞
SW1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEKO細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
PTK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞
KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞
B16-F10--RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
PA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞
KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞
IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞
SK RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞、H-322細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
RL-65 Adherent大鼠肺上皮細(xì)胞系
CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
MOLP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
A-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Raji細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞
TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
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