"NCI-H2108 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2108 Adherent人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
MV 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
NCI-H2108 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當(dāng)大，對細胞的傷害也是很大的。
LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
BMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
LS180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
NCI-H2108 Adherent人肺癌細胞系
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
T84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
Ha Fe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
PA12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
U-118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
HT-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
SK-NM-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
H-187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
HSAS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞
NCI-H2108 Adherent人肺癌細胞系
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
RT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細胞、SKO-007細胞、NCI-H28細胞
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、UMUC-14細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、QBI-293A細胞、CAL-78細胞
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