"EFM-192B Adherent人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EFM-192B Adherent人乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
HuPT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
EFM-192B Adherent人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２-３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
EFM-192B Adherent人乳腺癌細胞系
MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
K562/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
EA.Hy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
A-704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
RCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
H6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
SNU16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
EFM-192B Adherent人乳腺癌細胞系
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
LIM1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細胞、A172細胞、NOMO-1細胞
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細胞、RBL2H3細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、L-6細胞、RGB細胞
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