"SW780 Adherent人膀胱移行癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞,在凍存前24h換液;按照常規(guī)方法消化,離心,收集細胞沉淀;用血清重懸細胞沉淀,用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù);配制細胞凍存液,將凍存液加到細胞液中,吹打混勻,控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml;將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標(biāo)記好的凍存管中,旋緊管蓋;將凍存管放入程序凍存盒中,凍存盒立即移至-80°C冰箱中,過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳,會嚴重影響復(fù)蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存,凍存前一天細胞進行換液;消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復(fù)蘇的活率;凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作,會嚴重影響細胞活率。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW780 Adherent人膀胱移行癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
SW780 Adherent人膀胱移行癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
SW780 Adherent人膀胱移行癌細胞系
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
M059K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
NCI-H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞
H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
GM637A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
Ramos 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
32D-Cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
Kit225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
ND7/23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞
SW780 Adherent人膀胱移行癌細胞系
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、MDCK II細胞、Hs 600.T細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細胞、RS411細胞、GM2132細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細胞、THLE-2細胞、SkMel31細胞
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